جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4؛ تعرف إلى تركيبه ومزاياه

جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4، أو السيلوميتر، أو العداد الخلوي، والمتاح من شركة نيكلسوم بيو ساينس – Nexcelom Bioscience هو جهاز اتوماتيكي يتيح إمكانية عد الخلايا عن طريق مدى تقبلها لصبغة التريبان الزرقاء. تعرف إلى أهم استخداماته، تركيبه ومزاياه.

مزايا جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4

نستعرض فيما يلي أهم 5 مزايا له:

عد آلي وبسيط للخلايا في غضون 10 ثواني

يستخدم جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4 برنامجًا للتصوير والتعرف على المجال المضاء لاكتشاف الخلايا الفردية بسرعة وبدقة. كما يتم حساب عدد الخلايا، وقطرها وتركيزها ونسبة تقبلها للصبغة ومن ثم إخراج تقرير مفصل بكل البيانات أتوماتيكيا. ويوفر السيلوميتر Cellometer Auto T4 الميزات التالية:

• إمكانية تسجيل مجالات (fields) مختلفة للحصول على معلومات دقيقة للغاية.
• خيارات للتحقق من صحة IQ و OQ وبرنامج GLP / GMP.
• يساعد في حساب الخلايا الصعبة (غير منتظمة الشكل ومتكتلة).

التركيز والقابلية للصبغ في خطوة واحدة

يحسب جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4 بشكل متزامن تركيز ونسبة الخلايا القابلة للحياة إلى تلك ذات اللون الأزرق التريبان. Cellometer Auto T4 كونها تقنية استبعاد الصبغة، تكتشف كمية الخلايا القابلة للصبغ بصبغة التريبان الزرقاء وهي الخلايا الميتة. فلا يمكن أن تدخل الصبغة خلايا صحية، وبالتالي تظل غير ملونة. غشاء الخلية في الخلايا الميتة هو نافذ لصبغة التريبان الزرقاء. تظهر الخلايا الميتة ذات اللون الأزرق كخلايا داكنة في برنامج Cellometer مع تصوير مجال مشرق. في غضون 10 ثوان، يقدم جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4 تقارير:

• الخلايا الحية والتركيز الكلي للخلايا.
• عدد الخلايا الميتة والحيوية والإجمالية
• نسبة الخلايا القابلة للبقاء.
• متوسط قطر الخلايا.

تحليل حجم الخلية وعد الخلايا اعتماداً على الحجم

يقوم جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4 تلقائيًا بإنشاء رسم بياني لحجم الخلية اعتمادًا على قطر الخلايا. ونظرًا لأن عداد خلايا Cellometer Auto T4 ينتج قياسات من حجم الخلية الفردية، يمكن تركيب العديد من العينات على رسم بياني واحد. يساعد هذا في تحليل التغييرات التي تحدث في قطر الخلايا مع مرور الوقت.

في التجارب التي يتم فيها استخدام خلايا SF21 أو SF9، يمكن ملاحظة الصور المحفوظة وإعادة حسابها لدراسة التغيرات المورفولوجية مع مرور الوقت. يمكن تحسين إعدادات الحد الأقصى والحد الأدنى لقطر الخلية لحساب خلايا معينة موجودة في عينة. يوضح هذا المثال عد الخلايا الجذعية الناضجة التي تنمو من PBMCs بناءً على قطر الخلايا.

صور متعددة للخلايا للتحقق من البيانات

كل خلية مختلفة عن الأخرى. مع جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4، يمكن للمستخدمين عرض تشكل الخلية على الشاشة على الفور. ويتم التقاط زوجين من الصور ولكل منهما أربعة مجالات للعرض لكل خلية. هذا يتوافق مع مساحة أربعة أرباع من عدادة الكريات. علاوة على ذلك، يتم عرض الخلايا التي تم عدها على الشاشة لمزيد من التحقق مما إذا كان يتم تصوير الخلايا الموجودة في العينة ودراستها بشكل صحيح.

يمكن للمستخدمين تأكيد ما إذا تم:

• القضاء على حطام الخلايا.
• حساب الخلايا بشكل صحيح حسب شكلها وحجمها.
• عد الخلايا داخل الكتل بشكل فردي
• أرشفة الصور الخلوية وتصديرها لاستخدامها في العروض التقديمية والمنشورات.
• حفظ الصور المحفوظة مرة أخرى باستخدام إعدادات التحليل الافتراضية أو المعرفة من قبل المستخدم.

استبعاد الحطام

يكتشف عداد خلايا Cellometer Auto T4 الخلايا بناءً على التشكل والسطوع والحجم، وبالتالي يتم التخلص من الحطام الخلوي دون عناء وبدقة من نتائج العد. يمكن تغيير معاملات حجم الخلية لتحسين إزالة الحطام من النتائج وأيضًا تحسين دقة العد للخلايا ذات الأحجام المختلفة. يمكن تصور الصورة التي تم عدها لتأكيد إزالة الحطام من النتائج.

مزايا جهاز Cellometer Auto بالمقارنة بجهاز الهيموسيتوميتر اليدوي

يستغرق حوالي 5 دقائق لحساب 1 × 106 خلية باستخدام مقياس الكريات اليدوي (الهيموسيتوميتر). في بعض الأحيان، يستغرق حساب عدد الخلايا الميتة والحيوية ضعف الوقت على الأقل. يحدد جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4 عدد الخلايا وتركيزها للخلايا الميتة والخلايا الحية ويحسب أيضًا قابلية البقاء٪ في 10 ثوانٍ فقط. إضافة إلى ذلك فإن السيلوميتر الاتوماتيكي:

• يتخلص من أخطاء التسجيل والحساب.
• يقضي على أخطاء الأفراد في تحديد الخلية والحكم عليها.
• توفر خطوات الغسل وتهذيب الشريحة.
• يتم تقليل وقت العد، مما يتيح للمستخدمين إجراء المزيد من التجارب.

مزايا أخرى لجهاز السيلوميتر

يمكن تزويد جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4 ببرنامج GMP / GLP اختياري، خاصة للمختبرات التي تحتاج إلى الوصول إلى مراقبة الجودة والتدقيق. كما أنه يحتوي على بعض المميزات الهامة مثل:

• قالب مخصص يسمح الطباعة التلقائية.
• الربط والتحكم ببرنامج أكسس.
• سجل تدقيق.
• البيانات والصور الخلوية يمكن طباعتها وحفظها بسهولة.
• سهولة تصدير البيانات إلى Excel لمزيد من المشاركة وتنسيق البيانات. يمكن إرسال جداول البيانات والصور للنشر أو لصقها في عروض PowerPoint التقديمية.
• حفظ الصور والبيانات إلى جهاز كمبيوتر محلي أو شبكة.
• يمكن للمستخدمين الطباعة مباشرة من شاشة البرنامج. تُظهر النسخة المطبوعة المعتادة الخلايا الميتة والخلايا الحية والعدد الكلي للخلايا وتركيزها وصور الخلايا والنسبة المئوية للتطبيق.

غرف العد – لا تغسل أو تلوث

غرف العد المعدة للاستخدام مرة واحدة تتميز بغرفتين مغلقتين بشكل منفصل مع ارتفاع منظم بدقة. باستخدام ماصة قناة واحدة عادية، يتم وضع المعلق الخلوي 20 ميكرولتر في الغرفة. ثم يتم إدراج هذه الغرفة في عداد خلايا Cellometer Auto T4 ويتم تصوير الخلايا في النهاية. هذه التقنية من تحميل العينات وتحليلها سهلة ومثالية للخلايا الحساسة. توفر غرف عد خلايا الدم المستخدمة مرة واحدة العديد من الفوائد الرئيسية:

• لا يوجد خطر من التلوث المتبادل.
• القضاء على خطوة الغسيل مما يوفر الوقت.
• انخفض خطر (Biological hazard) للمستخدمين.
• غرف كبيرة العمق للخلايا الضخمة.
• ويمكن التحكم في حجم العينة التي تخضع للتحليل.

ما الذي يظهر في مجال الصورة باستخدام جهاز Cellometer Auto T4؟

• خلايا ميتة (مصبوغة) = دائرة حمراء.
• الخلايا الحية = الدائرة الخضراء.

مجال الصورة باستخدام جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4. ويقوم الجهاز بتحليل أكثر من 99% من خلايا الثدييات المستزرعة، بما في ذلك NCI-60 وخلايا MCF-7 المتكتلة.

NCI-60

عبارة عن فئة مكونة من 59 خطًا لسرطان الخلايا البشرية، والتي كانت في الأصل 60 خطًا خلويًا أنشأها المعهد الوطني للسرطان لأغراض الفحص. خطوط الخلايا، المستخرجة من أنسجة مختلفة (مثل الرئة والدماغ ونخاع العظام والمبيض والكلى والثدي والبشرة والبروستاتا والقولون)، تستخدم على نطاق واسع لتحليل تطور الأورام وفحص مركبات الأدوية التجريبية للسرطان.

خلايا غير منتظمة الشكل

يمكن للمستخدمين ضبط إعداد استدارة خلية Cellometer لاكتشاف وحساب الخلايا غير المنتظمة، مثل خلايا T المنشّطة وخلايا RD.

خلايا متكتلة

يمكن أن يكون خط خلايا سرطان الثدي MCF-7 متكتلًا تمامًا. يكتشف برنامج التعرف على الأنماط Cellometer ويحسب كل خلية موجودة داخل كتل الخلايا هذه لتحليلها بدقة.

جهاز العد الخلوي Cellometer Auto T4 من الأجهزة المعملية التي لا غنى عنها لضمان دقة النتائج وسلامة المستخدمين.